總結(jié)是對過去一定時(shí)期的工作、學(xué)習(xí)或思想情況進(jìn)行回顧、分析,并做出客觀評價(jià)的書面材料,它有助于我們尋找工作和事物發(fā)展的規(guī)律,從而掌握并運(yùn)用這些規(guī)律,是時(shí)候?qū)懸环菘偨Y(jié)了??偨Y(jié)怎么寫才能發(fā)揮它最大的作用呢?以下是小編精心整理的總結(jié)范文,供大家參考借鑒,希望可以幫助到有需要的朋友。
高中生物選修知識點(diǎn)總結(jié)篇一
尿素是一種重要的農(nóng)業(yè)氮肥,尿素并不能直接被農(nóng)作物吸收。只有當(dāng)土壤中的細(xì)菌將尿素分解成氨之后,才能被植物利用。土壤中的細(xì)菌之所以能分解尿素,是因?yàn)樗麄兡芎铣呻迕浮D蛩刈畛跏菑娜说哪蛞褐邪l(fā)現(xiàn)的。
篩選菌株:
(1)實(shí)驗(yàn)室中微生物的篩選應(yīng)用的原理
人為提供有利于目的菌株生長的條件(包括營養(yǎng)、溫度、ph等),同時(shí)抑制或阻止其他微生物生長。
(2)選擇性培養(yǎng)基
在微生物學(xué)中,將允許特定種類的微生物生長,同時(shí)抑制或阻止其他種類微生物生長的培養(yǎng)基,稱作選擇培養(yǎng)基。
(3)配制選擇培養(yǎng)基的依據(jù)
根據(jù)選擇培養(yǎng)的菌種的生理代謝特點(diǎn)加入某種物質(zhì)以達(dá)到選擇的目的。例如,培養(yǎng)基中不加入有機(jī)物可以選擇培養(yǎng)自養(yǎng)微生物;培養(yǎng)基中不加入氮元素,可以選擇培養(yǎng)能固氮的微生物;加入高濃度的食鹽可選擇培養(yǎng)金黃色葡萄球菌等。
統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目:
(1)測定微生物數(shù)量的常用方法有稀釋涂布平板法和顯微鏡直接計(jì)數(shù)。
(2)稀釋涂布平板法統(tǒng)計(jì)樣品中活菌的數(shù)目的原理。
當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時(shí),培養(yǎng)基表面生長的一個(gè)菌落,來源于樣品稀釋液中的一個(gè)活菌。通過統(tǒng)計(jì)平板上的菌落數(shù),就能推測出樣品中大約含有多少活細(xì)菌。為了保證結(jié)果準(zhǔn)確,一般設(shè)置3~5個(gè)平板,選擇菌落數(shù)在30~300的平板進(jìn)行計(jì)數(shù),并取平均值。統(tǒng)計(jì)的`菌落數(shù)往往比活菌的實(shí)際數(shù)目低,因此,統(tǒng)計(jì)結(jié)果一般用菌落數(shù)而不是活菌數(shù)來表示。
采用此方法的注意事項(xiàng):
1、一般選取菌落數(shù)在30~300之間的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)。
2、為了防止菌落蔓延,影響計(jì)數(shù),可在培養(yǎng)基中加入ttc。
3、本法僅限于形成菌落的微生物。
設(shè)置對照:設(shè)置對照的主要目的是排除實(shí)驗(yàn)組中非測試因素對實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響,提高實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可信度。對照實(shí)驗(yàn)是指除了被測試的條件以外,其他條件都相同的實(shí)驗(yàn),其作用是比照試驗(yàn)組,排除任何其他可能原因的干擾,證明確實(shí)是所測試的條件引起相應(yīng)的結(jié)果。
實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì):實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)包括實(shí)驗(yàn)方案,所需儀器、材料、用具和藥品,具體的實(shí)施步驟以及時(shí)間安排等的綜合考慮和安排。
(1)土壤取樣:同其他生物環(huán)境相比,土壤中的微生物,數(shù)量最大,種類最多。在富含有機(jī)質(zhì)的土壤表層,有更多的微生物生長。從富含有機(jī)物、潮濕、ph≈7的土壤中取樣。鏟去表層土,在距地表約3~8cm的土壤層取樣。
(2)樣品的稀釋:樣品的稀釋程度將直接影響平板上生長的菌落數(shù)目。在實(shí)際操作中,通常選用一定稀釋范圍的樣品液進(jìn)行培養(yǎng),以保證獲得菌落數(shù)在30~300之間、適于計(jì)數(shù)的平板。
(3)微生物的培養(yǎng)與觀察
不同種類的微生物,往往需要不同的培養(yǎng)溫度和培養(yǎng)時(shí)間。細(xì)菌30~37℃,1~2天;放線菌25~28℃,5~7天;霉菌25~28℃,3~4天。
每隔24小時(shí)統(tǒng)計(jì)一次菌落數(shù)目,選取菌落數(shù)目穩(wěn)定時(shí)的記錄作為結(jié)果,這樣可以防止因培養(yǎng)時(shí)間不足而導(dǎo)致一樓菌落的數(shù)目。一般來說,在一定的培養(yǎng)條件下(相同的培養(yǎng)基、唯獨(dú)及培養(yǎng)時(shí)間),同種微生物表現(xiàn)出穩(wěn)定的菌落特征。
高中生物選修知識點(diǎn)總結(jié)篇二
1、體內(nèi)細(xì)胞生活在細(xì)胞外液中
2、內(nèi)環(huán)境的組成及相互關(guān)系
(1)毛細(xì)淋巴管具有盲端,毛細(xì)血管沒有盲端,這是區(qū)別毛細(xì)淋巴管和毛細(xì)血管的方法。
(2)淋巴來源于組織液,返回血漿。圖示中組織液單向轉(zhuǎn)化為淋巴,淋巴單向轉(zhuǎn)化為血漿,這是判斷血漿、組織液、淋巴三者關(guān)系的突破口。
3、內(nèi)環(huán)境中存在和不存在的'物質(zhì)
(1)存在的物質(zhì)主要有:
①營養(yǎng)物質(zhì):水、無機(jī)鹽、葡萄糖、氨基酸、甘油、脂肪酸、維生素等。
②代謝廢物:co2、尿素等。
③調(diào)節(jié)物質(zhì):激素、抗體、遞質(zhì)、淋巴因子、組織胺等。
④其他物質(zhì):纖維蛋白原等。
(2)不存在的物質(zhì)主要有:①只存在于細(xì)胞內(nèi)的物質(zhì):血紅蛋白及與細(xì)胞呼吸、復(fù)制、轉(zhuǎn)錄、翻譯有關(guān)的酶等。 ②存在于消化道中的食物及分泌到消化道中的消化酶。
4、在內(nèi)環(huán)境中發(fā)生和不發(fā)生的生理過程
(1)發(fā)生的生理過程①乳酸與碳酸氫鈉作用生成乳酸鈉和碳酸實(shí)現(xiàn)ph的穩(wěn)態(tài)。 ②興奮傳導(dǎo)過程中神經(jīng)遞質(zhì)與受體結(jié)合。 ③免疫過程中抗體與相應(yīng)的抗原特異性地結(jié)合。 ④激素調(diào)節(jié)過程,激素與靶細(xì)胞的結(jié)合。
(2)不發(fā)生的生理過程(舉例) ①細(xì)胞呼吸的各階段反應(yīng)。 ②細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)、遞質(zhì)和激素等物質(zhì)的合成。 ③消化道等外部環(huán)境所發(fā)生的淀粉、脂質(zhì)和蛋白質(zhì)的消化水解過程。
技法提煉
內(nèi)環(huán)境成分的判斷方法
一看是否屬于血漿、組織液或淋巴中的成分(如血漿蛋白、水、無機(jī)鹽、葡萄糖、氨基酸、脂質(zhì)、o2、co2、激素、代謝廢物等)。若是,則一定屬于內(nèi)環(huán)境的成分。
二看是否屬于細(xì)胞內(nèi)液及細(xì)胞膜的成分(如血紅蛋白、呼吸氧化酶、解旋酶、dna聚合酶、rna聚合酶、載體蛋白等)。若是,則一定不屬于內(nèi)環(huán)境的成分。
三看是否屬于外界環(huán)境液體的成分(如消化液、尿液、淚液、汗液、體腔液等中的成分)。若是,則一定不屬于內(nèi)環(huán)境的成分。
5、細(xì)胞外液的理化性質(zhì)
(1)滲透壓:
血漿滲透壓:主要與無機(jī)鹽、蛋白質(zhì)的含量有關(guān),。細(xì)胞外液的滲透壓:主要與na+、cl-有關(guān)。
溶液滲透壓:溶液濃度越高,溶液滲透壓越大。
(2)酸堿度:正常人血漿接近中性,ph為7.35-7.45。與hco3-、hpo42-等離子有關(guān)。
(3)溫度:體細(xì)胞外液的溫度一般維持在37℃左右。
易錯(cuò)警示:與內(nèi)環(huán)境有關(guān)的2個(gè)易錯(cuò)點(diǎn):
(1)內(nèi)環(huán)境概念的適用范圍:內(nèi)環(huán)境屬于多細(xì)胞動物的一個(gè)概念,單細(xì)胞動物(原生動物)以及植物沒有所謂的內(nèi)環(huán)境。
(2)血漿蛋白≠血紅蛋白:血漿蛋白是血漿中蛋白質(zhì)的總稱,屬于內(nèi)環(huán)境的成分;而血紅蛋白存在于紅細(xì)胞內(nèi),不是內(nèi)環(huán)境的成分。
6、內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)態(tài)
(1)穩(wěn)態(tài):正常機(jī)體通過神經(jīng)系統(tǒng)和體液免疫調(diào)節(jié),使各個(gè)器官、系統(tǒng)協(xié)調(diào)活動,共同維持內(nèi)環(huán)境的相對穩(wěn)定狀態(tài)。
(2)機(jī)體維持穩(wěn)態(tài)的主要調(diào)節(jié)機(jī)制是神經(jīng)—體液—免疫調(diào)節(jié)。
(3)內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài)意義:內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài)是機(jī)體進(jìn)行正常生命活動的必要條件。
7、組織水腫及其產(chǎn)生原因分析
組織間隙中積聚的組織液過多將導(dǎo)致組織水腫,其引發(fā)原因如下
高中生物選修知識點(diǎn)總結(jié)篇三
1、目的基因是指: 編碼蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)基因 。
2、原核基因采取直接分離獲得,真核基因是人工合成。人工合成目的基因的常用方法有反轉(zhuǎn)錄法和化學(xué)合成法。
3、pcr技術(shù)擴(kuò)增目的基因
(1)pcr的含義:是一項(xiàng)在生物體外復(fù)制特定dna的片段的核酸合成技術(shù)。
(2)目的:獲取大量的目的基因
(3)原理:dna雙鏈復(fù)制
(4)過程:
第一步:加熱至90~95℃dna解鏈為單鏈;
第二步:冷卻到55~60℃,引物與兩條單鏈dna結(jié)合;
第三步:加熱至70~75℃,熱穩(wěn)定dna聚合酶從引物起始進(jìn)行互補(bǔ)鏈的合成。
(5)特點(diǎn):指數(shù)(2^n)形式擴(kuò)增
1、目的:使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在,并且可以遺傳至下一代,使目的基因能夠表達(dá)和發(fā)揮作用。
2、組成:目的基因+啟動子+終止子+標(biāo)記基因
(1)啟動子:是一段有特殊結(jié)構(gòu)的dna的片段,位于基因的首端,是rna聚合酶識別和結(jié)合的部位,能驅(qū)動基因轉(zhuǎn)錄出mrna,最終獲得所需的蛋白質(zhì)。
(2)終止子:也是一段有特殊結(jié)構(gòu)的dna的片段 ,位于基因的尾端。
(3)標(biāo)記基因的作用:是為了鑒定受體細(xì)胞中是否含有目的基因,從而將含有目的基因的細(xì)胞篩選出來。常用的標(biāo)記基因是抗生素基因。
1、轉(zhuǎn)化的概念:是目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞內(nèi),并且在受體細(xì)胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達(dá)的過程。
2、常用的轉(zhuǎn)化方法:
將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞:采用最多的方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法,其次還有基因槍法和花粉管通道法等。
將目的基因?qū)雱游锛?xì)胞:最常用的方法是顯微注射技術(shù)。方法的受體細(xì)胞多是受精卵。
先用ca2+處理細(xì)胞,使其成為感受態(tài)細(xì)胞 ,再將重組表達(dá)載體dna分子溶于緩沖液中與感受態(tài)細(xì)胞混合,在一定的溫度下促進(jìn)感受態(tài)細(xì)胞吸收dna分子,完成轉(zhuǎn)化過程。
3、重組細(xì)胞導(dǎo)入受體細(xì)胞后,篩選含有基因表達(dá)載體受體細(xì)胞的依據(jù)是標(biāo)記基因是否表達(dá)。
1、首先要檢測轉(zhuǎn)基因生物的染色體dna上是否插入了目的基因,方法是采用dna分子雜交(dna-dna)技術(shù)。
2、其次還要檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出mrna,方法是采用分子雜交(dna-rna)技術(shù)。
3、最后檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì),方法是采用抗原—抗體雜交技術(shù)。
4、有時(shí)還需進(jìn)行個(gè)體生物學(xué)水平的鑒定。如生物抗蟲或抗病的鑒定等。
高中生物選修知識點(diǎn)總結(jié)篇四
生物是理科中的文科,需要的邏輯思維并不用十分的強(qiáng),下面生物選修一知識點(diǎn)總結(jié)是小編為大家?guī)淼?,希望對大家有所幫助?/p>
一、果酒制作
1.原理:菌種 ,屬于 核生物,新陳代謝類型 ,有氧時(shí),呼吸的反應(yīng)式為: ;無氧時(shí),呼吸的反應(yīng)式為: 。
2.條件:繁殖最適溫度 ,酒精發(fā)酵一般控制在 。
(傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)所使用的酵母菌的來源)
3.菌種來源:
現(xiàn)在工廠化生產(chǎn)果酒,為提高果酒的品質(zhì),更好地抑制其它微生物的生長,采取的措施是 。
4.實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)流程圖
果酒 果醋
5.根據(jù)教材p4操作提示設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)步驟及裝置。
充氣口作用 ; 排氣口作用 ;
出料口作用 。
排氣口要通過一個(gè)長而彎曲的膠管與瓶身連接,其目的是 。
使用該裝置制酒時(shí),應(yīng)該關(guān)閉 ;
制醋時(shí),應(yīng)將充氣口 。
二、果醋的制作:
醋酸生成反應(yīng)式是___________________ _________ 。
2.條件:最適合溫度為__________,需要充足的______________。
3.菌種來源:到______________或______________購買。
4.設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)流程及操作步驟:
______________0c條件下發(fā)酵,適時(shí)向發(fā)酵液中______________。如果沒有充氣裝置,可以將瓶蓋打開,在瓶蓋上紗布,以減少空氣中塵土污染。
三、操作過程應(yīng)注意的問題
(1)為防止發(fā)酵液被污染,發(fā)酵瓶要用 消毒。
(2)葡萄汁裝入發(fā)酵瓶時(shí),要留出大約 的空間。
(3)制作葡萄酒時(shí)將溫度嚴(yán)格控制在 ,時(shí)間控制在 d左右,可通過 對發(fā)酵的情況進(jìn)行及時(shí)的監(jiān)測。
(4)制葡萄醋的過程中,將溫度嚴(yán)格控制在 ,時(shí)間控制在 d,并注意適時(shí)在 充氣。
【疑難點(diǎn)撥】
1、 認(rèn)為應(yīng)該先沖洗葡萄還是先除去枝梗?為什么?
應(yīng)該先沖洗,然后再除去枝梗,以避免除去枝梗時(shí)引起葡萄破損,增加被雜菌污染的機(jī)會。
2、 認(rèn)為應(yīng)該從哪些方面防止發(fā)酵液被污染?
需要從發(fā)酵制作的過程進(jìn)行全面的考慮,因?yàn)椴僮鞯拿恳徊蕉伎赡芑烊腚s菌。例如:榨汁機(jī)、發(fā)酵裝置要清洗干凈;每次排氣時(shí)只需擰松瓶蓋、不要完全揭開瓶蓋等。
答:溫度是酵母菌生長和發(fā)酵的重要條件。20 ℃左右最適合酵母菌繁殖。因此需要將溫度控制在其最適溫度范圍內(nèi)。而醋酸菌是嗜溫菌,最適生長溫度為30~35 ℃,因此要將溫度控制在30~35 ℃。
4.制葡萄醋時(shí),為什么要適時(shí)通過充氣口充氣?
答:醋酸菌是好氧菌,在將酒精變?yōu)榇姿釙r(shí)需要氧的參與,因此要適時(shí)向發(fā)酵液中充氣。
一、腐乳制作的原理
1.腐乳的發(fā)酵有多種微生物的協(xié)同作用,如 、 、 、
等,其中起主要作用的是 。它是一種絲狀 ,常見于 、 、 、 上。新陳代謝類型是 。
2. 等微生物產(chǎn)生的蛋白酶可以將豆腐中的 分解成小分子的 和 ;脂肪酶可以將 水解成 和 。
3.現(xiàn)代的腐乳生產(chǎn)是在嚴(yán)格的 條件下,將優(yōu)良 菌種直接接種在豆腐上,這樣可以避免 ,保證 。
二、腐乳制作的實(shí)驗(yàn)流程:
讓豆腐長出毛霉→ → →密封腌制。
三、實(shí)驗(yàn)材料
含水量70%的豆腐,粽葉,盤子,鹽,黃酒,米酒,糖,香辛料等,廣口玻璃瓶,高壓鍋。
四、實(shí)驗(yàn)步驟
1.將豆腐切實(shí)3cm×3cm×1cm若干塊
2.豆腐塊放在鋪有干粽葉的盤內(nèi),每塊豆腐等距離排放,豆腐上再鋪干凈粽葉,再用保鮮膜包裹。
3.將平盤放在溫度為 的地方,毛霉逐漸生長,大約5d后,豆腐表面叢生直立菌絲。
4.當(dāng)毛霉生長旺盛,呈淡黃色時(shí),去除保鮮膜及粽葉,散熱及水分,同時(shí)散去霉味約36h。
5.豆腐涼透后,將豆腐間的菌絲拉斷,整齊排在容器內(nèi),準(zhǔn)備腌制。
6.長滿毛霉的豆腐塊(以下稱毛坯)分層擺放,分層加鹽,并隨層高而增加 ,在瓶口表面鋪鹽 ,以防止 ,約腌制8d。
7.將黃酒、米酒和糖、香辛料等混合制成鹵湯。鹵湯酒精含量控制在 為宜。
8.廣口玻璃瓶刷洗干凈,用高壓鍋在1000c蒸汽滅菌30min,將腐乳成坯擺入瓶中,加入鹵湯和輔料后,將瓶口用酒精燈加熱滅菌,用膠條密封,常溫下,六個(gè)月即可以成熟。
【疑難點(diǎn)撥】
鹽能防止雜菌污染,避免豆腐腐敗。鹽能抑制多種微生物的生長。
酒精含量的高低與腐乳后期發(fā)酵時(shí)間的長短有很大關(guān)系。酒精含量越高,對蛋白酶的抑制作用也越大,使腐乳成熟期延長;酒精含量過低,蛋白酶的活性高,加快蛋白質(zhì)的水解,雜菌繁殖快,豆腐易腐敗,難以成塊。
3.豆腐坯用食鹽腌制,其作用是什么?
①滲透鹽分,析出水分 ②給腐乳以必要的咸味
③防止毛霉繼續(xù)生長和污染的雜菌繁殖 ④浸提毛霉菌絲上的蛋白酶
4.腐乳在釀造后期發(fā)酵中添加多量酒液的目的是什么?
①防止雜菌污染以防腐
③利于后期發(fā)酵
5.鹵湯中香辛料的作用是什么?
①調(diào)味②促進(jìn)發(fā)酵③殺菌防腐
解釋:(香辛料如花椒、大蒜、茴香中含有花椒酰胺、蒜辣素、茴香醚及茴香醛等,有極強(qiáng)的殺菌力;又有良好的調(diào)味功能;香辛料成分參與發(fā)酵過程,合成復(fù)雜的酯類,使腐乳形成特有色、香、味。)
6.你能利用所學(xué)的生物學(xué)知識,解釋豆腐長白毛是怎么一回事?
答:豆腐上生長的白毛是毛霉的白色菌絲。嚴(yán)格地說是直立菌絲,在豆腐中還有匍匐菌絲。
7.我們平常吃的豆腐,哪種適合用來做腐乳?
答:含水量為70%左右的豆腐適于作腐乳。用含水量過高的豆腐制腐乳,不易成形。
答:"皮"是前期發(fā)酵時(shí)在豆腐表面上生長的菌絲(匍匐菌絲),它能形成腐乳的"體",使腐乳成形。"皮"對人體無害。
一、基礎(chǔ)知識
3.在本課題中,我們主要探究有關(guān)加酶洗衣粉的三個(gè)問題:一是普通洗衣粉和加酶洗衣粉對衣物污漬的 效果有什么不同;二是在什么溫度下使用加酶洗衣粉 最好,三是 的洗衣粉,其洗劑效果有哪些區(qū)別。
二、實(shí)驗(yàn)操作
1.探究普通洗衣粉和加酶洗衣粉對衣物污漬的洗滌效果
(1)實(shí)驗(yàn)遵循的原則:實(shí)驗(yàn)變量為洗滌劑,設(shè)計(jì)時(shí)應(yīng)遵循 原則、 原則,有效地控制其他變量,如水的用量、污染物的量、所用實(shí)驗(yàn)用布的質(zhì)地大小、兩種洗衣粉的用量,攪拌及洗滌時(shí)間。
(2)實(shí)驗(yàn)過程
①取兩只大燒杯并 ,用量筒分別量500ml蒸餾水放入其中,放入400c的水浴鍋保溫。
②將制好的污染布和洗衣粉(一組為 和 ,另一組為 和 )分別放入兩只燒杯中。
③用玻璃棒同時(shí)充分?jǐn)嚢?時(shí)間,一段時(shí)間后攪拌可重復(fù)進(jìn)行。
④過相同的時(shí)間后觀察洗滌效果,探究加酶洗衣粉使用時(shí)的最適溫度。
2.不同種類的酶洗衣粉對同一污漬的洗滌效果
(1)實(shí)驗(yàn)原理:不同種類的加酶洗衣粉所加的酶不同,而酶具有 ,所以對不同污漬的洗滌效果不同。
(2)實(shí)驗(yàn)過程:根據(jù)表格設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)步驟
編號 污漬
1.普通洗衣粉中包含哪些化學(xué)成分?
提示:普通洗衣粉中通常包含有:表面活性劑、水軟化劑、堿劑、漂白劑等成分,有的洗衣粉中還含有增白劑、香精和色素,以及填充劑等。
2.在本課題中你打算使用什么方法和標(biāo)準(zhǔn)判斷洗滌效果?
3.含有蛋白酶的洗衣粉的洗劑效果好,可以用絲綢作為實(shí)驗(yàn)材料嗎?
不能。因?yàn)榻z綢的主要成分是蛋白質(zhì),它會被加酶洗衣粉中的蛋白酶分解,損壞衣物。
【典例解析】
高中生物選修知識點(diǎn)總結(jié)篇五
培養(yǎng)基:人們按照微生物對營養(yǎng)物質(zhì)的不同需求,配制出供其生長繁殖的營養(yǎng)基質(zhì),是進(jìn)行微生物培養(yǎng)的物質(zhì)基礎(chǔ)。
培養(yǎng)基按照物理性質(zhì)可分為液體培養(yǎng)基、半固體培養(yǎng)基和固體培養(yǎng)基。在液體培養(yǎng)基中加入凝固劑瓊脂(是從紅藻中提取的一種多糖,在配制培養(yǎng)基中用作凝固劑)后,制成瓊脂固體培養(yǎng)基。
微生物在固體培養(yǎng)基表面生長,可以形成肉眼可見的菌落。根據(jù)菌落的特征可以判斷是哪一種菌。液體培養(yǎng)基應(yīng)用于工業(yè)或生活生產(chǎn),固體培養(yǎng)基應(yīng)用于微生物的分離和鑒定,半固體培養(yǎng)基則常用于觀察微生物的運(yùn)動及菌種保藏等。
按照成分培養(yǎng)基可分為人工合成培養(yǎng)基和天然培養(yǎng)基。合成培養(yǎng)基是用成分已知的化學(xué)物質(zhì)配制而成,其中成分的種類比例明確,常用于微生物的分離鑒定。天然培養(yǎng)基是用化學(xué)成分不明的天然物質(zhì)配制而成,常用于實(shí)際工業(yè)生產(chǎn)。
按照培養(yǎng)基的用途,可將培養(yǎng)基分為選擇培養(yǎng)基和鑒定培養(yǎng)基。選擇培養(yǎng)基是指在培養(yǎng)基中加入某種化學(xué)物質(zhì),以抑制不需要的微生物生長,促進(jìn)所需要的微生物的生長。鑒別培養(yǎng)基是根據(jù)微生物的特點(diǎn),在培養(yǎng)基中加入某種指示劑或化學(xué)藥品配制而成的,用以鑒別不同類別的微生物。
培養(yǎng)基的化學(xué)成分包括水、無機(jī)鹽、碳源、氮源、生長因子等。
碳源:能為微生物的代謝提供碳元素的物質(zhì)。如co2、nahco3等無機(jī)碳源;糖類、石油、花生粉餅等有機(jī)碳源。異養(yǎng)微生物只能利用有機(jī)碳源。單質(zhì)碳不能作為碳源。
氮源:能為微生物的代謝提供氮元素的物質(zhì)。如n2、nh3、no3-、nh4+(無機(jī)氮源)蛋白質(zhì)、氨基酸、尿素、牛肉膏、蛋白胨(有機(jī)氮源)等。只有固氮微生物才能利用n2。
培養(yǎng)基還要滿足微生物生長對ph、特殊營養(yǎng)物質(zhì)以及氧氣的要求。例如,培養(yǎng)乳酸桿菌時(shí)需要在培養(yǎng)基中添加維生素,培養(yǎng)霉菌時(shí)須將培養(yǎng)基的ph調(diào)至酸性,培養(yǎng)細(xì)菌是需要將ph調(diào)至中性或微堿性,培養(yǎng)厭氧型微生物是則需要提供無氧的條件。
獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是防止外來雜菌的入侵,要注意以下幾個(gè)方面:
①對實(shí)驗(yàn)操作的空間、操作者的衣著和手,進(jìn)行清潔和消毒。
②將用于微生物培養(yǎng)的器皿、接種用具和培養(yǎng)基等器具進(jìn)行滅菌。
③為避免周圍環(huán)境中微生物的污染,實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)在酒精燈火焰附近進(jìn)行。
④實(shí)驗(yàn)操作時(shí)應(yīng)避免已經(jīng)滅菌處理的材料用具與周圍的物品相接觸。
消毒與滅菌的區(qū)別:
消毒指使用較為溫和的物理或化學(xué)方法僅殺死物體表面或內(nèi)部一部分對人體有害的微生物(不包括芽孢和孢子)。消毒方法常用煮沸消毒法,巴氏消毒法(對于一些不耐高溫的液體)還有化學(xué)藥劑(如酒精、氯氣、石炭酸等)消毒、紫外線消毒。
滅菌則是指使用強(qiáng)烈的理化因素殺死物體內(nèi)外所有的微生物,包括芽孢和孢子。滅菌方法有灼燒滅菌、干熱滅菌、高壓蒸汽滅菌。
滅菌方法:
①接種環(huán)、接種針、試管口等使用灼燒滅菌法;
②玻璃器皿、金屬用具等使用干熱滅菌法,所用器械是干熱滅菌箱;
③培養(yǎng)基、無菌水等使用高壓蒸汽滅菌法,所用器械是高壓蒸汽滅菌鍋;
④表面滅菌和空氣滅菌等使用紫外線滅菌法,所用器械是紫外燈。
高中生物選修知識點(diǎn)總結(jié)篇六
(2)向光彎曲的部位在胚芽鞘尖端下部
(3)產(chǎn)生生長素的部位在胚芽鞘尖端
2、胚芽鞘向光彎曲生長原因:
(2)縱向運(yùn)輸(極性運(yùn)輸):從形態(tài)學(xué)上端運(yùn)到下端,不能倒運(yùn)
(3)胚芽鞘背光一側(cè)的生長素含量多于向光一側(cè)(生長素分布不均,背光面多,向光面少),因而引起兩側(cè)的生長不均勻,從而造成向光彎曲。
生長素(溫特,瓊脂實(shí)驗(yàn)):吲哚乙酸(i高中生物必修三知識點(diǎn))
3、植物激素(赤霉素,細(xì)胞_,脫落酸,乙烯):由植物體內(nèi)產(chǎn)生、能從產(chǎn)生部位到作用部位,對植物的生長發(fā)育有顯著影響的微量有機(jī)物。
4、色氨酸經(jīng)過一系列反應(yīng)可轉(zhuǎn)變成生長素。
在植物體中生長素的產(chǎn)生部位:幼嫩的芽、葉和發(fā)育中的種子
生長素的分布:植物體的各個(gè)器官中都有分布,但相對集中在生長旺盛的部分。
5、植物體各個(gè)器官對生長素的敏感度不同:莖芽根
高中生物選修知識點(diǎn)總結(jié)篇七
;選修1知識點(diǎn)總結(jié) 微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng) 一、基礎(chǔ)知識 1. 培養(yǎng)基:人們按照微生物對營養(yǎng)物質(zhì)的不同需求,配制出供其生長繁殖的營養(yǎng)基質(zhì),是進(jìn)行微生物培養(yǎng)的物質(zhì)基礎(chǔ)。
(1)培養(yǎng)基的分類:
·培養(yǎng)基按照物理性質(zhì)可分為液體培養(yǎng)基、半固體培養(yǎng)基和固體培養(yǎng)基。
在液體培養(yǎng)基中加入凝固劑瓊脂(是從紅藻中提取的一種多糖,在配制培養(yǎng)基中用作凝固劑)后,制成瓊脂固體培養(yǎng)基。
微生物在固體培養(yǎng)基表面生長,可以形成肉眼可見的菌落。根據(jù)菌落的特征可以判斷是哪一種菌。
液體培養(yǎng)基應(yīng)用于工業(yè)或生活生產(chǎn),固體培養(yǎng)基應(yīng)用于微生物的分離和鑒定,半固體培養(yǎng)基則常用于觀察微生物的運(yùn)動及菌種保藏等。
·按照成分培養(yǎng)基可分為人工合成培養(yǎng)基和天然培養(yǎng)基。
合成培養(yǎng)基是用成分已知的化學(xué)物質(zhì)配制而成,其中成分的種類比例明確,常用于微生物的分離鑒定。
天然培養(yǎng)基是用化學(xué)成分不明的天然物質(zhì)配制而成,常用于實(shí)際工業(yè)生產(chǎn)。
·按照培養(yǎng)基的用途,可將培養(yǎng)基分為選擇培養(yǎng)基和鑒定培養(yǎng)基。
選擇培養(yǎng)基是指在培養(yǎng)基中加入某種化學(xué)物質(zhì),以抑制不需要的微生物生長,促進(jìn)所需要的微生物的生長。
鑒別培養(yǎng)基是根據(jù)微生物的特點(diǎn),在培養(yǎng)基中加入某種指示劑或化學(xué)藥品配制而成的,用以鑒別不同類別的微生物。
(2)培養(yǎng)基的成分:培養(yǎng)基的化學(xué)成分包括水、無機(jī)鹽、碳源、氮源、生長因子等。
·碳源:能為微生物的代謝提供碳元素的物質(zhì)。如co2、nahco3等無機(jī)碳源;
糖類、石油、花生粉餅等有機(jī)碳源。異養(yǎng)微生物只能利用有機(jī)碳源。單質(zhì)碳不能作為碳源。
·氮源:能為微生物的代謝提供氮元素的物質(zhì)。如n2、nh3、no3-、nh4+(無機(jī)氮源)蛋白質(zhì)、氨基酸、尿素、牛肉膏、蛋白胨(有機(jī)氮源)等。只有固氮微生物才能利用n2。
·培養(yǎng)基還要滿足微生物生長對ph、特殊營養(yǎng)物質(zhì)以及氧氣的要求。
例如,培養(yǎng)乳酸桿菌時(shí)需要在培養(yǎng)基中添加維生素,培養(yǎng)霉菌時(shí)須將培養(yǎng)基的ph調(diào)至酸性,培養(yǎng)細(xì)菌是需要將ph調(diào)至中性或微堿性,培養(yǎng)厭氧型微生物是則需要提供無氧的條件 2. 無菌技術(shù) a. 獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是防止外來雜菌的入侵,要注意以下幾個(gè)方面:
① 對實(shí)驗(yàn)操作的空間、操作者的衣著和手,進(jìn)行清潔和消毒。
② 將用于微生物培養(yǎng)的器皿、接種用具和培養(yǎng)基等器具進(jìn)行滅菌。
③ 為避免周圍環(huán)境中微生物的污染,實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)在酒精燈火焰附近進(jìn)行。
④ 實(shí)驗(yàn)操作時(shí)應(yīng)避免已經(jīng)滅菌處理的材料用具與周圍的物品相接觸。
b. 無菌技術(shù)除了用來防止實(shí)驗(yàn)室的培養(yǎng)物被其他外來微生物污染外,還有什么目的? 答:無菌技術(shù)還能有效避免操作者自身被微生物感染。
c. 消毒與滅菌的區(qū)別 ① 消毒指使用較為溫和的物理或化學(xué)方法僅殺死物體表面或內(nèi)部一部分對人體有害的微生物(不包括芽孢和孢子)。消毒方法常用煮沸消毒法,巴氏消毒法(對于一些不耐高溫的液體)還有化學(xué)藥劑(如酒精、氯氣、石炭酸等)消毒、紫外線消毒。
② 滅菌則是指使用強(qiáng)烈的理化因素殺死物體內(nèi)外所有的微生物,包括芽孢和孢子。滅菌方法有灼燒滅菌、干熱滅菌、高壓蒸汽滅菌。
d. 常用器具的滅菌方法:
① 接種環(huán)、接種針、試管口等使用灼燒滅菌法;
② 玻璃器皿、金屬用具等使用干熱滅菌法,所用器械是干熱滅菌箱;
③ 培養(yǎng)基、無菌水等使用高壓蒸汽滅菌法,所用器械是高壓蒸汽滅菌鍋。
④ 表面滅菌和空氣滅菌等使用紫外線滅菌法,所用器械是紫外燈。
比較項(xiàng) 理化因素的作用強(qiáng)度 消滅微生物的數(shù)量 芽孢和孢子能否被消滅 消毒 較為溫和 部分生活狀態(tài)的微生物 不能 滅菌 強(qiáng)烈 全部微生物 能 3.實(shí)驗(yàn)操作 (1)制作牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基 ① 方法步驟:計(jì)算、稱量、溶化、滅菌、倒平板。
② 倒平板操作:
a. 將滅過菌的培養(yǎng)皿放在火焰旁的桌面上,右手拿裝有培養(yǎng)基的錐形瓶,左手拔出棉塞。
b. 右手拿錐形瓶,將瓶口迅速通過火焰。
c. 用左手的拇指和食指將培養(yǎng)皿打開一條稍大于瓶口的縫隙,右手將錐形瓶中的培養(yǎng)基(約10~20ml)倒入培養(yǎng)皿,左手立即蓋上培養(yǎng)皿的皿蓋。
d. 等待平板冷卻凝固,大約需5~10min。然后,將平板倒過來放置,使培養(yǎng)皿蓋在下、皿底在上。
·倒平板操作的討論 ① 培養(yǎng)基滅菌后,需要冷卻到50℃左右時(shí),才能用來倒平板。你用什么辦法來估計(jì)培養(yǎng)基的溫度? 提示:可以用手觸摸盛有培養(yǎng)基的錐形瓶,感覺錐形瓶的溫度下降到剛剛不燙手時(shí),就可以進(jìn)行倒平板了。
② 為什么需要使錐形瓶的瓶口通過火焰? 答:通過灼燒滅菌,防止瓶口的微生物污染培養(yǎng)基。
③ 平板冷凝后,為什么要將平板倒置? 答:平板冷凝后,皿蓋上會凝結(jié)水珠,凝固后的培養(yǎng)基表面的濕度也比較高,將平板倒置,既可以使培養(yǎng)基表面的水分更好地?fù)]發(fā),又可以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基,造成污染。
④ 在倒平板的過程中,如果不小心將培養(yǎng)基濺在皿蓋與皿底之間的部位,這個(gè)平板還能用來培養(yǎng)微生物嗎?為什么? 答:空氣中的微生物可能在皿蓋與皿底之間的培養(yǎng)基上滋生,因此最好不要用這個(gè)平板培養(yǎng)微生物。
(2)純化大腸桿菌 ① 微生物接種的方法最常用的是平板劃線法和稀釋涂布平板法。
② 平板劃線法是通過接種環(huán)在瓊脂固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線的操作。將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面。在數(shù)次劃線后培養(yǎng),可以分離到由一個(gè)細(xì)胞繁殖而來的肉眼可見的子細(xì)胞群體,這就是菌落。
③ 稀釋涂布平板法是將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋,然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面,進(jìn)行培養(yǎng)。分為系列稀釋操作和涂布平板操作兩步。
④ 用平板劃線法和稀釋涂布平板法接種的目的是:使聚集在一起的微生物分散成單個(gè)細(xì)胞,從而能在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)的菌落,以便于純化菌種。
(3)平板劃線法操作步驟:
①將接種環(huán)放在火焰上灼燒,直到接種環(huán)燒紅。
②在火焰旁冷卻接種環(huán),并打開棉塞。
③將試管口通過火焰。
④將已冷卻的接種環(huán)伸入菌液中蘸取一環(huán)菌液。
⑤將試管通過火焰,并塞上棉塞。
⑥左手將皿蓋打開一條縫隙,右手將沾有菌種的接種環(huán)迅速伸入平板內(nèi),劃三至五條平行線,蓋上皿蓋。注意不要劃破培養(yǎng)皿。
⑦灼燒接種環(huán),待其冷卻后,從第一區(qū)域劃線的末端開始往第二區(qū)域內(nèi)劃線。重復(fù)以上操作,在三、四、五區(qū)域內(nèi)劃線。注意不要將最后一區(qū)的劃線與第一區(qū)相連。
⑧將平板倒置放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
·平板劃線操作的討論 1.為什么在操作的第一步以及每次劃線之前都要灼燒接種環(huán)?在劃線操作結(jié)束時(shí),仍然需要灼燒接種環(huán)嗎?為什么? 答:操作的第一步灼燒接種環(huán)是為了避免接種環(huán)上可能存在的微生物污染培養(yǎng)物;
每次劃線前灼燒接種環(huán)是為了殺死上次劃線結(jié)束后,接種環(huán)上殘留的菌種,使下一次劃線時(shí),接種環(huán)上的菌種直接來源于上次劃線的末端,從而通過劃線次數(shù)的增加,使每次劃線時(shí)菌種的數(shù)目逐漸減少,以便得到菌落。劃線結(jié)束后灼燒接種環(huán),能及時(shí)殺死接種環(huán)上殘留的菌種,避免細(xì)菌污染環(huán)境和感染操作者。
2.在灼燒接種環(huán)之后,為什么要等其冷卻后再進(jìn)行劃線? 答:以免接種環(huán)溫度太高,殺死菌種。
3.在作第二次以及其后的劃線操作時(shí),為什么總是從上一次劃線的末端開始劃線? 答:劃線后,線條末端細(xì)菌的數(shù)目比線條起始處要少,每次從上一次劃線的末端開始,能使細(xì)菌的數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增加而逐步減少,最終能得到由單個(gè)細(xì)菌繁殖而來的菌落。
(4)涂布平板操作的步驟:
①將涂布器浸在盛有酒精的燒杯中。
②取少量菌液,滴加到培養(yǎng)基表面。
③將沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃,待酒精燃盡后,冷卻8~10s。
④用涂布器將菌液均勻地涂布在培養(yǎng)基表面。
·涂布平板操作的討論 1. 涂布平板的所有操作都應(yīng)在火焰附近進(jìn)行。結(jié)合平板劃線與系列稀釋的無菌操作要求,想一想,第二步應(yīng)如何進(jìn)行無菌操作? 提示:應(yīng)從操作的各個(gè)細(xì)節(jié)保證“無菌”。例如,酒精燈與培養(yǎng)皿的距離要合適、吸管頭不要接觸任何其他物體、吸管要在酒精燈火焰周圍;
等等。
(4)菌種的保存 (1)對于頻繁使用的菌種,可以采用臨時(shí)保藏的方法。
①臨時(shí)保藏方法 將菌種接種到試管的固體斜面培養(yǎng)基上,在合適的溫度下培養(yǎng)。當(dāng)菌落長成后,將試管放入4℃的冰箱中保藏。以后每3~6個(gè)月,都要重新將菌種從舊的培養(yǎng)基上轉(zhuǎn)移到新鮮的培養(yǎng)基上。
②缺點(diǎn):這種方法保存的時(shí)間不長,菌種容易被污染或產(chǎn)生變異。
(2)對于需要長期保存的菌種,可以采用甘油管藏的方法。
在3ml的甘油瓶中,裝入1ml甘油后滅菌。將1ml培養(yǎng)的菌液轉(zhuǎn)移到甘油瓶中,與甘油充分混勻后,放在-20℃的冷凍箱中保存。
(5)疑難解答 ① 生物的營養(yǎng) 營養(yǎng)是指生物攝取、利用營養(yǎng)物質(zhì)的過程。營養(yǎng)物質(zhì)是指維持機(jī)體生命活動,保證發(fā)育、生殖所需的外源物質(zhì)。
人及動物的營養(yǎng)物質(zhì):水、無機(jī)鹽、糖類、脂質(zhì)、蛋白質(zhì)、維生素六類。
植物的營養(yǎng)物質(zhì):礦質(zhì)元素、水、二氧化碳等三類。
微生物的營養(yǎng)物質(zhì):水、無機(jī)鹽、碳源、氮源及特殊營養(yǎng)物質(zhì)五類。
② 確定培養(yǎng)基制作是否合格的方法 將未接種的培養(yǎng)基在恒溫箱中保溫1~2天,無菌落生長,說明培養(yǎng)基的制備是成功的,否則需要重新制備。
土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù) 尿素:是一種重要的農(nóng)業(yè)氮肥,尿素并不能直接被農(nóng)作物吸收。只有當(dāng)土壤中的細(xì)菌將尿素分解成氨之后,才能被植物利用。土壤中的細(xì)菌之所以能分解尿素,是因?yàn)樗麄兡芎铣呻迕?。尿素最初是從人的尿液中發(fā)現(xiàn)的 一、篩選菌株:
(1)實(shí)驗(yàn)室中微生物的篩選應(yīng)用的原理:
人為提供有利于目的菌株生長的條件(包括營養(yǎng)、溫度、ph等),同時(shí)抑制或阻止其他微生物生長。
(2)選擇性培養(yǎng)基 在微生物學(xué)中,將允許特定種類的微生物生長,同時(shí)抑制或阻止其他種類微生物生長的培養(yǎng)基,稱作選擇培養(yǎng)基。
(3)配制選擇培養(yǎng)基的依據(jù) 根據(jù)選擇培養(yǎng)的菌種的生理代謝特點(diǎn)加入某種物質(zhì)以達(dá)到選擇的目的。例如,培養(yǎng)基中不加入有機(jī)物可以選擇培養(yǎng)自養(yǎng)微生物;
培養(yǎng)基中不加入氮元素,可以選擇培養(yǎng)能固氮的微生物;
加入高濃度的食鹽可選擇培養(yǎng)金黃色葡萄球菌等。
二、統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目 (1)測定微生物數(shù)量的常用方法有稀釋涂布平板法和顯微鏡直接計(jì)數(shù)。
(2)稀釋涂布平板法統(tǒng)計(jì)樣品中活菌的數(shù)目的原理 當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時(shí),培養(yǎng)基表面生長的一個(gè)菌落,來源于樣品稀釋液中的一個(gè)活菌。通過統(tǒng)計(jì)平板上的菌落數(shù),就能推測出樣品中大約含有多少活細(xì)菌。為了保證結(jié)果準(zhǔn)確,一般設(shè)置3~5個(gè)平板,選擇菌落數(shù)在30~300的平板進(jìn)行計(jì)數(shù),并取平均值。統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)往往比活菌的實(shí)際數(shù)目低,因此,統(tǒng)計(jì)結(jié)果一般用菌落數(shù)而不是活菌數(shù)來表示。
三、設(shè)置對照 設(shè)置對照的主要目的是排除實(shí)驗(yàn)組中非測試因素對實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響,提高實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可信度。對照實(shí)驗(yàn)是指除了被測試的條件以外,其他條件都相同的實(shí)驗(yàn),其作用是比照試驗(yàn)組,排除任何其他可能原因的干擾,證明確實(shí)是所測試的條件引起相應(yīng)的結(jié)果。
四、實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì) 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)包括實(shí)驗(yàn)方案,所需儀器、材料、用具和藥品,具體的實(shí)施步驟以及時(shí)間安排等的綜合考慮和安排。
(1)土壤取樣:同其他生物環(huán)境相比,土壤中的微生物,數(shù)量最大,種類最多。在富含有機(jī)質(zhì)的土壤表層,有更多的微生物生長。從富含有機(jī)物、潮濕、ph≈7的土壤中取樣。鏟去表層土,在距地表約3~8cm的土壤層取樣。
(2)樣品的稀釋:樣品的稀釋程度將直接影響平板上生長的菌落數(shù)目。在實(shí)際操作中,通常選用一定稀釋范圍的樣品液進(jìn)行培養(yǎng),以保證獲得菌落數(shù)在30~300之間、適于計(jì)數(shù)的平板。
測定土壤中細(xì)菌的數(shù)量,一般選用104、105、106 測定放線菌的數(shù)量,一般選用103、104、105 測定真菌的數(shù)量,一般選用102、103、104 (3)微生物的培養(yǎng)與觀察 不同種類的微生物,往往需要不同的培養(yǎng)溫度和培養(yǎng)時(shí)間。
細(xì)菌30~37℃ 1~2天 放線菌25~28℃ 5~7天 霉菌25~28℃ 3~4天 每隔24小時(shí)統(tǒng)計(jì)一次菌落數(shù)目,選取菌落數(shù)目穩(wěn)定時(shí)的記錄作為結(jié)果,這樣可以防止因培養(yǎng)時(shí)間不足而導(dǎo)致一樓菌落的數(shù)目。一般來說,在一定的培養(yǎng)條件下(相同的培養(yǎng)基、唯獨(dú)及培養(yǎng)時(shí)間),同種微生物表現(xiàn)出穩(wěn)定的菌落特征。形狀、大小、隆起程度、顏色 五、疑難解答 (1)如何從平板上的菌落數(shù)推測出每克樣品中的菌落數(shù)? 統(tǒng)計(jì)某一稀釋度下平板上的菌落數(shù),最好能統(tǒng)計(jì)3個(gè)以上平板,計(jì)算出平板菌落數(shù)的平均值 每克樣品中的菌落數(shù)=(c/v)*m 其中,c代表某一稀釋度下平板上生長的平均菌落數(shù),v代表涂布平板時(shí)所用的稀釋液的體積(ml),m代表稀釋倍數(shù) 分解纖維素的微生物的分離 一、纖維素與纖維素酶 纖維素:一種由葡萄糖首尾相連而成的高分子化合物,是地球上含量最豐富的多糖類物質(zhì)。
(1)棉花是自然界中纖維素含量最高的天然產(chǎn)物,木材、作物秸稈等也富含纖維素。
(2)纖維素酶是一種復(fù)合酶,一般認(rèn)為它至少包括三種組分,即c1酶、cx酶和葡萄糖苷酶,前兩種酶使纖維素分解成纖維二糖,第三種酶將纖維二糖分解成葡萄糖。纖維素最終被水解成葡萄糖,為微生物的生長提供營養(yǎng)。
二、纖維素分解菌的篩選 (1)篩選方法:剛果紅染色法。能夠通過顏色反應(yīng)直接對微生物進(jìn)行篩選。
(2)剛果紅染色法篩選纖維素分解菌的原理 剛果紅是一種染料,它可以與像纖維素這樣的多糖物質(zhì)形成紅色復(fù)合物,但并不和水解后的纖維二糖和葡萄糖發(fā)生這種反應(yīng)。當(dāng)我們在含有纖維素的培養(yǎng)基中加入剛果紅時(shí),剛果紅能與培養(yǎng)基中的纖維素形成紅色復(fù)合物。當(dāng)纖維素被纖維素酶分解后,剛果紅-纖維素的復(fù)合物就無法形成,培養(yǎng)基中會出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈。這樣,我們就可以通過是否產(chǎn)生透明圈來篩選纖維素分解菌。
三、分離分解纖維素的微生物的實(shí)驗(yàn)流程 土壤取樣→選擇培養(yǎng)(此步是否需要,應(yīng)根據(jù)樣品中目的菌株數(shù)量的多少來確定)→梯度稀釋→將樣品涂布到鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基上→挑選產(chǎn)生透明圈的菌落 (1)土壤采集:選擇富含纖維素的環(huán)境。
(2)剛果紅染色法分離纖維素分解菌的步驟:倒平板操作、制備菌懸液、涂布平板 (3)剛果紅染色法種類:
一種是先培養(yǎng)微生物,再加入剛果紅進(jìn)行顏色反應(yīng),另一種是在倒平板時(shí)就加入剛果紅。
四、課題延伸 對分解纖維素的微生物進(jìn)行了初步的篩選后,只是分離純化的第一步,為確定得到的是纖維素分解菌,還需要進(jìn)行發(fā)酵產(chǎn)纖維素酶的實(shí)驗(yàn),纖維素酶的發(fā)酵方法有液體發(fā)酵和固體發(fā)酵兩種。纖維素酶的測定方法,一般是對纖維素酶分解濾紙等纖維素后所產(chǎn)生的葡萄糖進(jìn)行定量的測定。
五、疑難解答 (1)為什么要在富含纖維素的環(huán)境中尋找纖維素分解菌? 由于生物與環(huán)境的相互依存關(guān)系,在富含纖維素的環(huán)境中,纖維素分解菌的含量相對提高,因此從這種土樣中獲得目的微生物的幾率要高于普通環(huán)境。
(2)將濾紙埋在土壤中有什么作用?你認(rèn)為濾紙應(yīng)該埋進(jìn)土壤多深? 將濾紙埋在土壤中能使纖維素分解菌相對聚集,實(shí)際上是人工設(shè)置纖維素分解菌生存的適宜環(huán)境。一般應(yīng)將紙埋于深約10cm左右腐殖土壤中。
(3)兩種剛果紅染色法的比較 方法一是傳統(tǒng)的方法,缺點(diǎn)是操作繁瑣,加入剛果紅溶液會使菌落之間發(fā)生混雜;
其優(yōu)點(diǎn)是這樣顯示出的顏色反應(yīng)基本上是纖維素分解菌的作用。
方法二的優(yōu)點(diǎn)是操作簡便,不存在菌落混雜問題,缺點(diǎn)是由于纖維素和瓊脂、土豆汁中都含有淀粉類物質(zhì),可以使能夠產(chǎn)生淀粉酶的微生物出現(xiàn)假陽性反應(yīng)。但這種只產(chǎn)生淀粉酶的微生物產(chǎn)生的透明圈較為模糊,因?yàn)榕囵B(yǎng)基中纖維素占主要地位,因此可以與纖維素酶產(chǎn)生的透明圈相區(qū)分。方法二的另一缺點(diǎn)是:有些微生物具有降解色素的能力,它們在長時(shí)間培養(yǎng)過程中會降解剛果紅形成明顯的透明圈,與纖維素分解菌不易區(qū)分。
(4)為什么選擇培養(yǎng)能夠“濃縮”所需的微生物? 在選擇培養(yǎng)的條件下,可以使那些能夠適應(yīng)這種營養(yǎng)條件的微生物得到迅速繁殖,而那些不適應(yīng)這種營養(yǎng)條件的微生物的繁殖被抑制,因此可以起到“濃縮”的作用。
果酒和果醋的制作 一、實(shí)驗(yàn)原理 酶 1.酒精發(fā)酵的原理:
酶 ① 酵母菌進(jìn)行有氧呼吸大量繁殖,表達(dá)式為:c6h12o6+o2→co2+h2o+能量 ② 酵母菌進(jìn)行無氧呼吸產(chǎn)生酒精和二氧化碳,表達(dá)式為:c6h12o6→c2h5oh+co2+能量 ③ 酵母菌的營養(yǎng)代謝類型為異養(yǎng)兼性厭氧型。在有氧時(shí),酵母菌大量繁殖,但是不起到發(fā)酵效果;
在無氧時(shí),繁殖速度減慢,但是此時(shí)可以進(jìn)行發(fā)酵。在利用酵母菌發(fā)酵時(shí)最好是先通入足夠的無菌空氣在有氧環(huán)境下一段時(shí)間使其繁殖,再隔絕氧氣進(jìn)行發(fā)酵。20℃左右最適合酵母菌繁殖,酒精發(fā)酵的最佳溫度是在18℃~25℃,ph最好是弱酸性。
酶 2.醋酸發(fā)酵的原理:
① 醋酸菌是好氧型細(xì)菌,當(dāng)缺少糖源時(shí)和有氧條件下,可將乙醇(酒精)氧化成醋酸。
表達(dá)式為:c2h5oh+o2→ch3cooh+h2o;
當(dāng)氧氣、糖源都充足時(shí),醋酸菌將葡萄汁中的糖分解成醋酸。
醋酸菌生長的最佳溫度是在30℃~35℃ 二、實(shí)驗(yàn)步驟 1. 對發(fā)酵瓶、紗布、榨汁機(jī)、盛葡萄汁的器皿等實(shí)驗(yàn)用具進(jìn)行清洗并消毒。先用溫水反復(fù)沖洗幾次,再用體積分?jǐn)?shù)為75%的酒精擦拭消毒,晾干待用。
2. 取葡萄500 g,去除枝梗和腐爛的子粒。
3. 用清水沖洗葡萄1~2遍除去污物,注意不要反復(fù)多次沖洗。
4. 用榨汁機(jī)榨取葡萄汁后,將其裝入發(fā)酵瓶中或?qū)⑵咸汛虺蓾{后,用潔凈的紗布過濾至發(fā)酵瓶中,蓋好瓶蓋。如果沒有合適的發(fā)酵裝置,可以用500 ml的塑料瓶替代,但注入的果汁量不要超過塑料瓶總體積的2/3。
5. 將發(fā)酵瓶置于適宜的溫度下發(fā)酵。
6. 由于發(fā)酵旺盛期co2的產(chǎn)量非常大,因此需要及時(shí)排氣,防止發(fā)酵瓶爆裂。如果使用簡易的發(fā)酵裝置,如瓶子(最好選用塑料瓶),每天要擰松瓶蓋2~4次,進(jìn)行排氣。
7. 10 d以后,可以開始進(jìn)行取樣檢驗(yàn)工作。例如,可以檢驗(yàn)酒味、酒精的含量、進(jìn)行酵母菌的鏡檢等工作。
8. 當(dāng)果酒制成以后,可以在發(fā)酵液中加入醋酸菌或醋曲,然后將裝置轉(zhuǎn)移至30~35 ℃的條件下發(fā)酵,適時(shí)向發(fā)酵液中充氣。如果找不到醋酸菌菌種或醋曲,可嘗試自然接種,但效果不是很好。如果沒有充氣裝置,可以將瓶蓋打開,在瓶口蓋上紗布,以減少空氣中塵土等的污染。
三、注意事項(xiàng) 請分析此裝置中的充氣口、排氣口和出料口分別有哪些作用。為什么排氣口要通過一個(gè)長而彎曲的膠管與瓶身連接?結(jié)合果酒、果醋的制作原理,你認(rèn)為應(yīng)該如何使用這個(gè)發(fā)酵裝置? 充氣口 排氣口 出料口 答:充氣口是在醋酸發(fā)酵時(shí)連接充氣泵進(jìn)行充氣用的;
排氣口是在酒精發(fā)酵時(shí)用來排出co2的;
出料口是用來取樣的。排氣口要通過一個(gè)長而彎曲的膠管與瓶身連接,其目的是防止空氣中微生物的污染。使用該裝置制酒時(shí),應(yīng)該關(guān)閉充氣口;
制醋時(shí),應(yīng)將充氣口連接氣泵,輸入氧氣。
腐乳的制作 一、 實(shí)驗(yàn)原理 1.參與豆腐發(fā)酵的微生物有青霉、酵母、曲霉、毛霉等多種,其中起主要作用的是毛霉。
3.毛酶等微生物產(chǎn)生的蛋白酶能將豆腐中的蛋白質(zhì)分解成小分子的肽和氨基酸;
脂肪酶可將脂肪分解成甘油和脂肪酸。
二、實(shí)驗(yàn)步驟 1.將豆腐切成3cm×3cm×1cm的若干塊。所用豆腐的含水量為70%左右,水分過多則腐乳不易成形。
2.將豆腐塊平放在鋪有干粽葉的盤內(nèi),粽葉可以提供菌種,并能起到保溫的作用。每塊豆腐等距離排放,周圍留有一定的空隙。豆腐上面再鋪上干凈的粽葉。氣候干燥時(shí),將平盤用保鮮膜包裹,但不要封嚴(yán),以免濕度太高,不利于毛霉的生長。
3.將平盤放入溫度保持在15~18?℃的地方。毛霉逐漸生長,大約5?d后豆腐表面叢生著直立菌絲。
4.當(dāng)毛霉生長旺盛,并呈淡黃色時(shí),去除包裹平盤的保鮮膜以及鋪在上面的粽葉,使豆腐塊的熱量和水分能夠迅速散失,同時(shí)散去霉味。這一過程一般持續(xù)36?h以上。
5.當(dāng)豆腐涼透后,將豆腐間連接在一起的菌絲拉斷,并整齊排列在容器內(nèi),準(zhǔn)備腌制。
6.長滿毛霉的豆腐塊(以下稱毛坯)與鹽的質(zhì)量分?jǐn)?shù)比為5∶1。將培養(yǎng)毛坯時(shí)靠近平盤沒長直立菌絲的一面統(tǒng)一朝向玻璃瓶邊,將毛坯分層盤立擺放在容器中。分層加鹽,并隨層加高而增加鹽量,在瓶口表面鋪鹽厚些,以防止雜菌從瓶口進(jìn)入。約腌制8?d。
〔注:加鹽可以析出豆腐中的水分,有利于腐乳成型;
鹽能夠抑制微生物的生長,并且可以調(diào)味。用鹽腌制時(shí),注意鹽都用量。鹽的濃度過低,不足以抑制微生物生長,可能導(dǎo)致豆腐腐敗變質(zhì);
鹽的濃度過高,會影響腐乳的口味?!?7.將黃酒、米酒和糖,按口味不同而配以各種香辛料(如胡椒、花椒、八角茴香、桂皮、姜、辣椒等)混合制成鹵湯。鹵湯酒精含量控制在12%左右為宜。
〔注:酒精含量的高低與腐乳后期發(fā)酵時(shí)間的長短有很大關(guān)系。酒精含量越高,對蛋白酶的抑制作用也越大,使腐乳成熟期延長;
酒精含量過低,蛋白酶的活性高,加快蛋白質(zhì)的水解,雜菌繁殖快,豆腐易腐敗,難以成塊?!? 8.將廣口玻璃瓶刷干凈后,用高壓鍋在100?℃蒸汽滅菌30?min。將腐乳咸坯擺入瓶中,加入鹵湯和輔料后,將瓶口用酒精燈加熱滅菌,用膠條密封。在常溫情況下,一般六個(gè)月可以成熟。
三、注意事項(xiàng) 1.釀造腐乳的主要生產(chǎn)工序是將豆腐進(jìn)行前期發(fā)酵和后期發(fā)酵。前期發(fā)酵所發(fā)生的主要變化是毛霉在豆腐(白坯)上的生長。發(fā)酵的溫度為15~18?℃,此溫度不適于細(xì)菌、酵母菌和曲霉的生長,而適于毛霉慢慢生長。毛霉生長大約5?d后使白坯變成毛坯。前期發(fā)酵的作用,一是使豆腐表面有一層菌膜包住,形成腐乳的“體”;
二是毛霉分泌以蛋白酶為主的各種酶,有利于豆腐所含有的蛋白質(zhì)水解為各種氨基酸。后期發(fā)酵主要是酶與微生物協(xié)同參與生化反應(yīng)的過程。通過腌制并配入各種輔料(紅曲、面曲、酒釀),使蛋白酶作用緩慢,促進(jìn)其他生化反應(yīng),生成腐乳的香氣。
高中生物選修知識點(diǎn)總結(jié)篇八
1、“分子手術(shù)刀”——限制性核酸內(nèi)切酶(限制酶)
(1)來源:主要是從原核生物中分離純化出來的。
(2)功能:能夠識別雙鏈dna分子的某種特定的核苷酸序列,并且使每一條鏈中特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開,因此具有專一性。
(3)結(jié)果:
經(jīng)限制酶切割產(chǎn)生的dna的片段末端通常有兩種形式:黏性末端和平末端。
2、“分子縫合針”——dna連接酶
①相同點(diǎn):都縫合磷酸二酯鍵。
②區(qū)別:e·colidna連接酶來源于大腸桿菌,只能將雙鏈dna的片段互補(bǔ)的黏性末端之間的磷酸二酯鍵連接起來;而t4dna連接酶能縫合兩種末端,但連接平末端的之間的效率較低。
(2)與dna聚合酶作用的異同:
dna聚合酶只能將單個(gè)核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端,形成磷酸二酯鍵。dna連接酶是連接兩個(gè)dna的片段的末端,形成磷酸二酯鍵。
3、“分子運(yùn)輸車”——載體
(1)載體具備的條件:
①能在受體細(xì)胞中復(fù)制并穩(wěn)定保存。
②具有一至多個(gè)限制酶切點(diǎn),供外源dna的片段插入。
③具有標(biāo)記基因,供重組dna的鑒定和選擇。
(2)最常用的載體是質(zhì)粒,它是一種裸露的、結(jié)構(gòu)簡單的、獨(dú)立于細(xì)菌染色體之外,并具有自我復(fù)制能力的雙鏈環(huán)狀dna分子。
(3)其它載體:λ噬菌體的衍生物、動植物病毒。