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檢驗專業(yè)考試臨床檢驗基礎(chǔ)知識篇一

為了幫助考生系統(tǒng)的復(fù)習(xí)2017年檢驗專業(yè)考試課程，全面的了解檢驗專業(yè)考試考試教材的相關(guān)重點，為此應(yīng)屆畢業(yè)生考試網(wǎng)小編特編輯整理了2017年檢驗專業(yè)考試臨床檢驗基礎(chǔ)精選，希望對您參加本次考試有所幫助!

小吞噬細胞的運動可以分成隨機運動和定向運動，前者類似于布朗運動。檢測方法是將采集的白細胞懸液滴于玻片上，用光學(xué)顯微鏡直接觀察其運動。也可用毛細血管法將細胞懸液裝入硅化毛細血管中，稍加離心，使細胞沉積在一端，切去無細胞的毛細血管段，繼而移放在含細胞培養(yǎng)液的培養(yǎng)小瓶中，37℃溫育18～20h，游動的細胞將從毛細血管內(nèi)外移，在管口形成一細胞團，根據(jù)細胞面積可判斷受檢中性粒細胞活動的強弱。某些患者中性粒細胞的任意運動明顯減弱，甚至消失。中性粒細胞的定向運動表現(xiàn)為趨化運動，測定方法有多種，其原理相同，而方法大同小異，常用以下兩法：

小室法又稱濾膜小室法，采用特殊的小盒裝置，盒中以一片3～5μm孔徑的微孔濾膜將盒分為上下兩小室。上室加受檢的白細胞懸液;下室加細菌菌體或其產(chǎn)物、酵母菌活化的血清等趨化因子。置37℃溫育數(shù)小時。上室中的中性粒細胞因受下室內(nèi)趨化因子的招引，使細胞由濾膜微孔進入濾膜內(nèi)，最后取濾膜，經(jīng)固定、干燥、著染、脫色等步驟，將透明后的濾膜置油鏡下檢測細胞在膜內(nèi)通過的距離，求其趨化單位。

2.瓊脂糖凝膠平板法將含小牛血清的1%瓊脂糖傾到在玻片或平皿中制成凝膠平板，繼而打孔，每三孔為一組，中央孔加細胞懸液，兩側(cè)孔分別加趨化因子或?qū)φ张囵B(yǎng)液，經(jīng)37℃溫育2～3h后，用2%戊二醛固定，移去瓊脂糖層，經(jīng)染色后，測量細胞運動的距離，按下式計算移動指數(shù)。

檢測原則是將受檢細胞懸液按一定比例混和，繼加活的白色念珠菌懸液，保溫生，加美藍溶液作活體染色，取樣涂片鏡檢。如胞內(nèi)白色念珠菌呈藍色，表示該菌已被殺死，共計100200個細胞，分別求其吞噬率和殺菌率。

溶細胞法更能直接反映細胞殺菌的情況，將受檢的.細胞懸液與一定量已經(jīng)新鮮人血清調(diào)理過的大腸桿菌或金黃色葡萄球菌懸液混合后，置37℃，每隔一定時間取定量培養(yǎng)物，稀釋后接種固體平板培養(yǎng)基，37℃培養(yǎng)18h后，計算菌落數(shù)，據(jù)以計算中性粒細胞的殺菌能力。

正常情況下，對大腸桿菌的殺菌率約為90%，對金黃色葡萄球菌的殺菌率約為85%.

在臨床常用的硝基四氮唑藍(nbt)還原試驗，本法用以檢測中性粒細胞的胞內(nèi)殺菌能力，由于中性粒細胞在殺菌過程中能量消耗劇增，耗氧量亦隨之相應(yīng)增加，磷酸己糖旁路代謝活力增強，葡萄糖6-磷酸氧化脫氫，此時加入nbt可接受所脫的氫，使原先呈淡黃包的nbt還原成點狀或塊狀甲朊顆粒并沉積在胞漿內(nèi)。

近此年來還采用了新穎的化學(xué)發(fā)光法，中性粒細胞在吞噬經(jīng)調(diào)理的金黃色葡萄球菌過程中，伴有化學(xué)發(fā)光的產(chǎn)生，故可用化學(xué)發(fā)光儀測定中性粒細胞的吞噬功能及其代謝活性。實驗證明全血化學(xué)發(fā)光試驗可同時獲得兩種信息，即中性粒細胞的吞噬功能、代謝活性及受檢血清的調(diào)理功能。由于中性粒細胞的氧代謝活性與對細胞的吞噬率密切相關(guān)，殺菌能力與發(fā)光強度相平行，因此化學(xué)發(fā)光法可檢測細胞殺菌功能。因此吞噬細胞化學(xué)發(fā)光測定法可用以研究中性粒細胞的吞噬功能，代謝活性和血清調(diào)理功能，它可在生理溫度和中性環(huán)境下測定，能較好地反映生理條件下吞噬細胞的功能，具有準(zhǔn)確靈敏、樣品用量少，簡便快速等優(yōu)點。其敏感性高于nbt還原試驗。

正常小鼠肝中枯否細胞可吞噬清除90%炭粒，脾巨噬細胞約吞噬清除10%炭粒，據(jù)此給小鼠定量靜脈注射印度墨汁(炭粒懸液)，間隔一定時間反復(fù)取靜脈血，測定血中炭粒的濃度，根據(jù)血流中炭粒被廓清的速度，判斷巨噬細胞的功能。

(二)吞噬功能的檢測

巨噬細胞具有較強的吞噬功能，實驗室常用比細菌大的細胞性抗原作為被吞噬顆粒，如雞紅細胞。其檢測原理是將受檢細胞與適量的顆?？乖旌虾?，置37℃保溫0.5～1h，其間時加振搖，最后離心取測定細胞制成涂片，染色鏡檢，分別計數(shù)出吞噬百分比和吞噬指數(shù)。各實驗室應(yīng)根據(jù)自己的條件建立正常參考值。

(三)巨噬細胞溶酶體酶的測定

巨噬細胞富含溶酶體酶，如酸性磷酸酶、非特異性酯酶、溶菌酶等，測定這些酶的活性也是衡量巨噬細胞功能的實用指標(biāo)之一。

1.酸磷酸酶的測定

(1)硝酸鉛法：本法優(yōu)點是用普通試劑，價格便宜，一般實驗室均有條件做，封片后可較長時間保存，并可用電子顯微鏡研究觀察細胞的超微結(jié)構(gòu)。缺點是細胞必需固定，而且固定條件要求嚴(yán)格，如處理不當(dāng)酶活性易消失，反應(yīng)步驟也較多。

該法基本原理是在適當(dāng)?shù)拿感詶l件下，巨噬細胞內(nèi)的酸性磷酸酶能使β甘油磷酸鈉水解成磷酸鹽后，后者與硝酸鉛反應(yīng)產(chǎn)生磷酸鉛，而磷酸鉛再與硫酸銨反應(yīng)則形成黑色硫化鉛，沉積在胞漿內(nèi)酸所在處，顯示棕黑色顆粒。酶活性強弱可根據(jù)顆粒的數(shù)量和粗細不同而分級判斷，顆粒數(shù)量少則細的為+，顆粒多而粗的為++，顆粒很多且很粗的為+++。

(2)偶氮法：本法操作簡便，反應(yīng)液中的底物α-萘磷酸鈉被酸性磷酸酶分解后，形成萘酚和磷酸鹽，而萘酚結(jié)構(gòu)中的羥基(-oh)鄰近的活潑碳原子，立即與偶氮染料起反應(yīng)，而產(chǎn)生鮮艷的棕色沉積在酶所在處，缺點是封片后保存時間短。

2.非特異性酶的測定該酶比較穩(wěn)定，酶活性喪失較慢，細胞經(jīng)涂片干燥，置室溫至少可保存半天至一天，因此特別有利于臨床檢驗室采用。

常用α-萘醋酸法，該酶可將-萘醋酸分解成萘酚和醋酸，萘酚迅速與偶染料結(jié)合，形成有色反應(yīng)物而沉積。

(四)巨噬細胞促凝血活性測定

激活巨噬細胞可產(chǎn)生一種與膜結(jié)合的凝血活性因子，加速正常血漿的凝固，為此取已經(jīng)37℃預(yù)溫的正常兔血漿和cac12混合液，加入經(jīng)粘附單層巨噬細胞的試管中，移置37℃，即時記錄血漿凝固時間。實驗證明當(dāng)巨噬細胞與lps、腫瘤相關(guān)抗原或hbsag等溫育后，可見血漿凝固時間明顯縮短。本法穩(wěn)定方便，也是檢測不同疾病患者巨噬細胞功能的指標(biāo)之一。

(五)巨噬細胞表面受體的檢測

成熟的巨噬細胞表面具有fc受體和c3b受體，這些受體能識別經(jīng)igg和c3b調(diào)理的顆粒，并迅速與之結(jié)合，促使細胞對相應(yīng)顆粒的吞噬，為此檢測這些受體可間接判斷巨噬細胞的功能。常用抗羊紅細胞致敏的羊紅細胞懸液作指示物進行ea花環(huán)試驗，也可用抗原(e)抗體(a)補體(c)復(fù)合物作eac花環(huán)試驗。由于操作繁鎖，現(xiàn)僅供研究用。

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